阪崎腸桿菌屬于腸桿菌科,它對所有年齡段的人都易感,尤其是嬰幼兒。本文主要介紹國標(biāo)中檢測克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)的操作方法。
前增菌和增菌
取檢樣100g(mL)置滅菌錐形瓶中,加入900mL已預(yù)熱至44 ℃的緩沖蛋白胨水,用手緩緩地?fù)u動至充分溶解,36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18h±2h。移取1mL轉(zhuǎn)種于10mL mLST-Vm 肉湯,44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24h±2h。
分離
輕輕混勻 mLST-Vm 肉湯培養(yǎng)物,各取增菌培養(yǎng)物1環(huán),分別劃線接種于兩個(gè)阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板,顯色培養(yǎng)基須符合 GB4789.28的要求,36 ℃±1 ℃培養(yǎng)24h±2h,或按培養(yǎng)基要求條件培養(yǎng)。
顯色培養(yǎng)基推薦使用上HiMedia公司生產(chǎn)的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(貨號:MV1577),該培養(yǎng)基適用于從食物、牛奶和奶制品中分離鑒定阪崎克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌),采用無瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨,產(chǎn)品有GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485認(rèn)證證書,安全可靠,產(chǎn)品符合國標(biāo)克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)檢驗(yàn)國家標(biāo)準(zhǔn)(GB4789.40—2016)相關(guān)要求,是國標(biāo)中優(yōu)選產(chǎn)品。
挑取至少5個(gè)可疑菌落,不足5個(gè)時(shí)挑取全部可疑菌落,劃線接種于 TSA 平板。25 ℃±1 ℃培養(yǎng)48h±4h。
鑒定
自TSA 平板上直接挑取黃色可疑菌落,進(jìn)行生化鑒定。克羅諾桿菌屬的主要生化特征見表1。可選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)。
表 1 克羅諾桿菌屬的主要生化特征