當(dāng)我們在養(yǎng)細(xì)胞的時候,有可能會出現(xiàn)如下的狀況:
細(xì)胞生長緩慢
細(xì)胞變形
碎片增加
懸浮細(xì)胞容易成團(tuán)
培養(yǎng)基提前變色
鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點(diǎn)
如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細(xì)胞株老化、細(xì)菌污染……原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示:細(xì)胞可能出現(xiàn)了支原體污染。據(jù)報(bào)道,細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)生支原體污染的機(jī)率較高,會達(dá)到70%左右,常規(guī)抗生素的使用對支原體幾乎無效。
那么,支原體污染,對細(xì)胞培養(yǎng)有什么危害呢?
支原體穿透真核細(xì)胞表面 大量支原體聚集在真核細(xì)胞表面(掃描電鏡照片)
細(xì)胞被支原體污染,解決方案
方法一:確認(rèn)細(xì)胞已被支原體污染,終止試驗(yàn),丟棄所有被污染的細(xì)胞和耗材。
重新復(fù)蘇細(xì)胞,注意選用未被污染的細(xì)胞株、血清和培養(yǎng)基,并規(guī)范操作。
方法二:對于珍貴的,樣品不可再得的細(xì)胞,或價(jià)格昂貴的種子細(xì)胞,不但無法丟棄,而且作為種子細(xì)胞,還需要**支原體污染。
此時,需選用特異性的支原體殺除劑,清除污染,保護(hù)細(xì)胞。
目前世界上有效的方法是是德國的一款生物試劑,由Minerva公司生產(chǎn),品名Mynox®。