細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長,在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動(dòng)物)。培養(yǎng)物是單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群。細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)都要生活在人工環(huán)境中,由于環(huán)境的改變,細(xì)胞的移動(dòng)或受一些其他因素的影響,培養(yǎng)時(shí)間加長,傳代導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)單一化型。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,由于實(shí)驗(yàn)環(huán)境、操作者鼻腔口腔、實(shí)驗(yàn)器材等很多地方都有支原體的存在。因此,細(xì)胞發(fā)生支原體污染的頻率很高。據(jù)美國數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),細(xì)胞發(fā)生支原體污染的幾率在70%以上。
同時(shí),由于支原體直徑很小,僅在180nm~350nm之間,只有通過電鏡才能看到。因此,支原體污染不易被實(shí)驗(yàn)者肉眼發(fā)覺。而支原體污染是個(gè)循序的過程,普通抗生素對其無效。因此,被支原體污染的細(xì)胞會(huì)持續(xù)受到影響,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。
支原體污染不僅是細(xì)胞培養(yǎng)中需要克服的現(xiàn)象,而且是制藥、生物制品生產(chǎn)中需要加以避免的。支原體污染的影響是什么?
抑制細(xì)胞增殖達(dá)50%
●影響免疫反應(yīng)
●影響病毒增殖和感染率
●引起染色體畸變和易位
●干擾雜交瘤技術(shù)使被污染細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基更敏感
●在細(xì)胞壁上附著支原體會(huì)改變細(xì)胞壁完整性。
●降低電穿孔轉(zhuǎn)染率達(dá)5%
總之,支原體污染影響細(xì)胞所有的代謝功能。
通常來說,被污染的細(xì)胞應(yīng)該丟棄,以避免成為污染源。但對于珍貴的細(xì)胞,以往別的品牌的支原體清除劑,其實(shí)只是抑制劑,它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成,但無法殺除。是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌,可與支原體膜特異性結(jié)合,破壞膜通透性,導(dǎo)致支原體膨脹破裂而死。