與傳統的細胞培養不同,三維(3D)細胞培養,可以更好地重現細胞在體內的狀態。該方法正逐漸成為細胞培養領域的一大熱門。
3D培養種類眾多,從原理上可以大致分為以下三類:
一、3D水凝膠培養
交聯的多聚鏈,或復雜的天然或合成蛋白分子組成的網絡構成的水凝膠,具有與天然組織相似的生物物理學特性,因此,可以作為3D細胞培養的基質。該材料可以單獨作為基質使用,也可以與其他材料聯合使用。常見的3D水凝膠培養材料有有ECM凝膠、胞外基質等。
該方法優勢在于以下幾點:
1.應用歷程久,支持文獻較多;
2.提供天然生物配體;
3.通常含有生長因子和細胞因子。
二、細胞聚集
細胞聚集是指幾個細胞聚集在一起形成菌團的現象。懸滴培養板與低粘附平面等材料都能使細胞有很好的聚集效果。
該方法的優勢在于以下幾點:
1.有各種各樣的相關器材可供挑選
2.細胞成球的大小相對更好控制
三、培養支架
培養支架是一種提供物理支撐的培養手段,細胞可以進入支架間隙生長并行使功能。培養支架大致可分為兩大類:
天然支架(如膠原、明膠、纖維蛋白、幾丁聚糖等),生物兼容性,但穩定性較差。
合成支架(如聚苯乙烯、聚己內酯、聚氨酯等),具有一致性、穩定性比較好,生物兼容性較差。
該方式的優勢在于以下幾點:
1.一致性或生物兼容性都能夠照顧到;
2.與現有的生物培養器皿以及下游分析方法都有比較好的兼容。
無論是普通的細胞培養還是3D培養,都需要合適的細胞培養體系,來給細胞提供營養與生長環境。胎牛血清作為一種重要的添加成分,其品質的優劣,在一定程度上決定了細胞實驗結果是否理想。
Ausbian進口特級胎牛血清,采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發育好后這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
出廠前均應經過嚴格質控,并附詳細《檢測報告》,如pH值、滲透壓、內毒素、病毒檢測、促細胞生長能力、無菌等檢查。其中,由于內毒素直接參與細胞凋亡,對細胞培養結果影響較大,且不同批次的血清,內毒素差異又不易控制。
Ausbian血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,盡可能避免血清反復凍融。