體外研究是減少動物實驗的基本工具,具有廣泛的應用,包括疾病建模(如衰老和癌癥)、組織再生、基因治療、藥物開發和疫苗生產。此外,近幾年來,體外三維(3D)培養的建立,如球體和類器官的出現,提供了更強大和可靠的人體組織模型。因此,3d培養是未來取代動物模型的一種很有前景的策略。然而,細胞培養及相關技術,包括3d培養和生物打印,通常依賴于動物源性產品,如FBS、胰蛋白酶、膠原蛋白、明膠等。
FBS被認為是培養基的通用補充劑,因為它的組成包括激素、維生素、轉運蛋白和促進細胞粘附、增殖和代謝的生長因子。
FBS在細胞生長培養基中的濃度根據細胞類型從2%到20%不等,常用的添加濃度是10%,FBS可以影響細胞增殖。
例如,研究表明,人骨髓間充質干細胞(BM - MSCs)的增殖與培養基中FBS的百分比成正比。當FBS濃度從5%增加到20%時,BM - MSC增殖呈濃度依賴性增加。另一方面,免疫抑制分子,如白細胞介素10和吲哚胺2,3雙加氧酶1,在7%和10%的FBS中產量比較好,而在5%或20%的FBS中產量減少,因此強調了根據實驗目的選擇正確的FBS濃度來維持培養中的MSC的重要性。有趣的是,正如Abbasalipour等人所證明的那樣,FBS還可以提高細胞轉導的效率。他們發現,在細胞接種前用FBS包被的板增加了附著的K562細胞(人淋巴母細胞)的數量,并且與未包被的條件相比,慢病毒轉導效率提高了。FBS也被廣泛用作細胞遷移試驗中的化學引誘劑。
在細胞培養中使用FBS存在與污染物相關的缺點,如內毒素、支原體、病毒和朊病毒蛋白,但也由于不同批次的未定義成分。為了證明這一點,來自不同制造商的三批FBS被證明對成人培養的色素視網膜上皮細胞的生長有不同的促進作用。通過蛋白質組學分析,發現促生長能力最高的FBS批次含有其他兩個批次未檢測到的生長因子和蛋白質,如轉化生長因子β1 (TGF‐β1)、膠質生長因子和胰島素樣生長因子結合蛋白4。不同季節獲得的血清批次質量的變化也會通過改變細胞生長、活力和形態影響實驗的可重復性。
綜上所述,在進行細胞實驗時,需要嚴格挑選高品質的胎牛血清。選購時,需關注內毒素、微生物檢測、相關蛋白檢測等指標,還應關注批次庫存等情況。
Ausbian進口胎牛血清,澳洲血源,多批次平行供應,購買前提供不同批次試用服務,且血清內毒素含量低,各項微生物檢測均合格。